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Periódicos Brasileiros em Medicina Veterinária e Zootecnia

p. 26-31

Purificação de fração enriquecida de binder of sperm protein 1 (BSP 1) do fluido seminal bovino através da técnica de precipitação por sulfato de amônio

Andreza Rodrigues VianaKamila de Sousa OtávioArlindo de Alencar Araripe Noronha MouraGustavo Ferrer Carneiro

Objetivou-se no presente estudo realizar purificação parcial da proteína binder of sperm protein1 (BSP1), proteína de 15 kDa presente nos fluidos das glândulas vesiculares de bovinos, por meio deprecipitação com sulfato de amônio. O fluido seminal foi extraído das glândulas vesiculares obtidas dedez touros bos indicus em abatedouro comercial de Fortaleza, Ceará. As glândulas foram transportadas eprocessadas no Laboratório de Fisiologia Animal da Universidade Federal do Ceará. Foi utilizado umcoquetel inibidor de proteases, com posterior centrifugação. Um pool de todas as amostras foiarmazenado a -20 ºC e uma alíquota foi reservada para determinar a concentração de proteína. Para aprecipitação de proteínas, foram adicionadas diferentes concentrações de sulfato de amônio. Foramrealizados SDS-PAGE e Western blot com anticorpo específico. Obtivemos a presença de BSP1. Foiobservada presença da proteína em todas as frações, porém, a fração 40-60% foi a que apresentou a maiorconcentração de BSP1, em média 98%. A técnica utilizada foi altamente eficaz e a purificação dessasproteínas possibilita uma melhoria na qualidade seminal in vitro e pode ser utilizada para obtenção deamostras altamente enriquecidas de BSPs, além de avaliar o potencial de fertilidade de reprodutores.(AU)

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