Um método de extração de DNA novo, inofensivo e de alto teor de endosperma para o trigo
Ma, ZhihuiWang, YuquanWei, WenhuiRu, Zhengang
Neste estudo, foi desenvolvido um método de extração de DNA não destrutivo, de alto débito e endosperma. Para verificar a natureza não destrutiva deste método, um teste de germinação foi realizado em 288 sementes após a amostragem do endosperma, o que deu uma taxa de emergência de plântulas maior (97,6%) do que a do grupo controle (92%). Para confirmar a viabilidade do novo método, o DNA foi extraído de plantas de uma população de BC1F2 por dois métodos diferentes, a saber, do endosperma usando nosso método rápido de alto rendimento (ER-DNA) e de folhas jovens que emergem da mesma semente amostrada usando o método CTAB (LC-DNA). O ER-DNA foi indetectável por eletroforese em gel de agarose, mas foi encontrado como uma substituição adequada para LC-DNA para a amplificação e detecção de repetições simples de seqüência (SSRs). Uma análise posterior revelou que o ER-DNA era geralmente adequado para a geração de fragmentos específicos de 500-750 pb, mas não para a amplificação de fragmentos de 1.000-2.000 pb. Nosso método rápido e de alto débito, portanto, não tem efeitos deletérios sobre as sementes de trigo e produz DNA para a genotipagem de SSR que é uma alternativa adequada ao DNA obtido tradicionalmente.(AU)
Texto completo