Kinetics of high-Level of ß-glucosidase production by a 2-deoxyglucose-resistant mutant of Humicola lanuginosa in submerged fermentation
Bokhari, Syed Ali ImranLatif, FarooqRajoka, Muhammad Ibrahim
Um mutante de Hemicola lanuginosa resistente a 2-deoxiglucose(M7) foi obtido através de exposição de conídios a raios , permitindo a expressão em caldo contendo 0,6% de 2-deoxiglucose (DG) e celobiose (1%) antes da semeadura em ágar DG esculina citrato de ferro amoniacal, da qual foram selecionadas as colônias com halo negro. Os parâmetros cinéticos para produção aumentada de ß-glucosidase (BGL) foram obtidos empregando-se sabugo de milho como fonte de carbono. A combinação de espiga de milho com água de maceração de milho foi a que forneceu os valores mais altos nos parâmetros cinéticos de formação de todos os produtos. O efeito da temperatura na cinética e atributos termodinâmicos da produção de BGL pelas cepas selvagem e M7 foi avaliado empregando-se processo de batelada em oito temperaturas diferentes in frascos em agitação. O melhor desempenho foi observado a 45ºC e 20g.l-1 de espiga de milho em 64h. Tanto a multiplicação quanto a formação do produto foram muito altas a 45ºC e ambas estavam ligadas em condições ótimas de trabalho. O rendimento de BGL produzido pelo mutante M7 (1556 U.g-1 de espiga seca) foi significativamente superior aos valores reportados para todos os sistemas fúngicos e bacterianos. A mutação influenciou a termoestabilização no microrganismo, sendo que o mutante necessitou de energia de ativação mais baixa para multiplicação e valores mais baixos de entalpia e entropia para a formação do produto quando comparado à cepa selvagem e a outros microrganismos mesofilicos e termotolerantes. Na fase de inativação, os microrganismos necessitaram valores mais baixos de energia de ativação, entalpia e entropia para o equilíbrio da formação de produto, confirmando a natureza termofílica da máquina metabólica do mutante.
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