Monoclonal antibodies against an outer membrane protein from pathogenic Leptospira
Lüdtke, Charli BeatrizCoutinho, Mariana LonerJouglard, Sandra Denise DornelesMoreira, Cecília NunesFernandes, Cláudia Hartleben PinhoBrod, Claudiomar SoaresHaake, David A.Ko, Albert IcksangDellagostin, Odir AntonioAleixo, José Antonio Guimarães
Foram obtidos dois hibridomas secretores de anticorpos monoclonais (MAbs) que reagem com uma lipoproteína (LipL32) da membrana externa de leptospiras patogênicas. Para a produção dos hibridomas, células do baço de camundongos BALB/c, imunizados com LipL32 recombinante (rLipL32), foram fusionadas com células SP2/O-Ag14, selecionadas em meio HAT e testadas em ELISA indireto. Um dos MAbs secretados pelos hibridomas é do isotipo IgG2b e o outro do isotipo IgM. A especificidade dos MAbs foi confirmada em ELISA indireto e immunoblotting usando rLipL32 purificada, Escherichia coli (E. coli) expressando LipL32 e sorovares patogênicos e saprófitas. Os dois MAbs reagiram com a maioria dos sorovares patogênicos e não reagiram com sorovares saprófitas. Os MAbs possuem potencial para uso em testes de diagnóstico de leptospirose.
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