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Periódicos Brasileiros em Medicina Veterinária e Zootecnia

Identification of bacterial agents of enteric diseases by multiplex PCR in growing-finishing pigs

Regina Baccaro, MariaMicke Moreno, AndreaTieko Shinya, LucianeSabatini Dotto, Daniela

A enterite proliferativa suína, a espiroquetose colônica, a disenteria suína e a salmonelose são as doenças entéricas mais freqüentes em suínos das fases de crescimento e terminação no Brasil. O diagnóstico destas doenças através de técnicas bacteriológicas tradicionais é difícil, lento e no caso da enterite proliferativa suína, impossível. A detecção destes agentes através da reação de polimerase em cadeia é altamente sensível e específica e está se tornando uma ferramenta muito útil no diagnóstico em Medicina Veterinária. No presente estudo foram testadas duas técnicas de PCR sob a forma de "multiplex"para detecção e identificação simultânea dos agentes bacterianos envolvidos na enterite proliferativa suína, na espiroquetose colônica, na disenteria suína e na salmonelose em amostras de fezes diarreicas. O DNA obtido de culturas puras de cada agente sozinho ou misturado em diferentes combinações e concentrações foram amplificados utilizando a Multiplex PCR específica para Lawsonia intracellularis e Salmonella, ou Brachispyra pilosicoli e Brachispyra hyodysenteriae. Após a padronização, a M-PCR foi aplicada na detecção dos quatro agentes em 541 amostras de fezes diarreicas de suínos provenientes de diferentes Estados do Brasil. O agente mais freqüente foi Lawsonia intracellularis (13%), seguido pela Salmonella spp. (4,8%), B. hyodysenteriae (1,4%), B. pilosicoli (1%) e suas diferentes associações. Os resultados obtidos indicam que as duas reações testadas permitem a detecção destes quatro importantes patógenos entéricos de maneira rápida e específica.

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