Use of RAPD, enzyme activity staining, and colony size to differentiate phytopathogenic Fuzarium Oxysporum isolates from Iran

Motallebi, MostafaReza Zamani, MohammadJazayeri, OmidJavad Harighi, Mohammad

Fusarium oxysporum é um fitopatógeno amplamente difundido nos solos. A doença amarela do grão-de-bico (Cicer arietinum), causada por ele é destrutiva e um grande problema nas regiões produtoras do Irã. Três métodos de laboratório: amplificação aleatória de DNA genômico (RAPD), coloração de atividade enzimática e determinação das dimensões de colônia, foram usados para diferenciar isolados de Fusarium oxysporum altamente virulentos (HV) e fracamente virulentos (WV). Baseado no tamanho da colônia (método morfológico tradicional) e na capacidade dos isolados produzirem enzimas pécticas, cinco isolados HV foram diferenciados de três WV. Enquanto os isolados HV formaram colônias grandes (entre 10,1 e 12,6 mm de diâmetro) e apresentaram o mesmo padrão enzimático, os isolados WV produziram colônias pequenas (entre 5,8 e 7,8 mm de diâmetro) e não tiveram atividade enzimática detectável no gel de cobertura corado. Doze primers arbitrários foram testados nos 8 isolados de Fusarium oxysporum por reação de polimerase em cadeia (PCR). As análises dos dados da amplificação de DNA pelo método de amplificação aleatória do DNA polimórfico (RAPD) diferenciaram os isolados HV dos WV. Os resultados obtidos pelo teste RAPD confirmaram a classificação dos 8 isolados pelos testes de patogenicidade, tamanho da colônia e atividade enzimática de coloração nos dois grupos, HV e WV.

1. Fusarium oxysporum
2. tamanho de colônia
3. RAPD
4. enzyme activity staining
5. colony size
6. nzimáticaatividade enzimática