Infleunce of pH on the partition of glucose-6-phosphate dehydrogenase and hexokinase in aqueous two-phase system
Pereira da Silva, DanielZanella Ribeiro Pontes, MarcelaAparecida de Souza, MariaVitolo, MicheleBatista de Almeida e Silva, JoãoPessoa-Junior, Adalberto
Glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH) e hexoquinase (HK) são importantes enzimas usadas em estudos bioquímicos e médicos e em diversos métodos analíticos. Sistema de duas fases aquosas (SDFA) formado por uma solução polimérica e uma solução eletrolítica proporciona um método para separação e purificação de enzimas com diversas vantagens, incluindo biocompatibilidade, que pode ser facilmente escalonado para nível industrial. Neste trabalho, os efeitos de diferentes valores de pH na estabilidade e na partição (K, coeficiente de partição) por SDFA das enzimas G6PDH e HK, obtidas através de levedura de panificação, foram investigados. Os resultados, obtidos do sistema constituído por 17,5% de PEG 400 e 15,0% de fosfato, mostraram que com a elevação do pH de 5,0 para 8,8, o K HK aumentou 26 vezes e o K G6PDH 2,2 vezes. No sistema 20,0% PEG 1500 : 17,5% fosfato, quando o valor do pH variou de 3,8 para 8,8. os valores de K HK e K G6PDH aumentaram e 13 vezes e 1,2 vez, respectivamente. Isto permite concluir que o coeficiente de partição, para ambas as enzimas, é favorecido pela elevação do pH. Uma análise estatística dos resultados foi conduzida para confirmar esta conclusão.
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