Identification and properties of two extracellular proteases from Brevundimonas diminuta

Adriano Chaia, AndréGiovanni-De-Simone, SalvatoreDias Gonçalves Petinate, SimonePaula Cabral de Araújo Lima, AnaHelena Branquinha, MartaBeatriz Vermelho, Alane

Proteases extracelulares de Brevundimonas diminuta (Pseudomonas diminuta) foram identificadas e caracterizadas por eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecilsulfato de sódio, contendo um substrato co-polimerizado. Duas proteases foram detectadas migrando em 67 kDa e 50 kDa: ambas hidrolisaram preferencialmente a gelatina, embora a caseína também tenha sido degradada e uma pequena hidrólise tenha sido observada com hemoglobina. Nenhuma atividade proteolítica extracelular foi detectada nos géis contendo soro albumina bovina. Condições ótimas de temperatura e pH para a atividade proteolítica foram observadas entre 40ºC e 50ºC e numa faixa de pH que variou de 7,0 a 11,0, respectivamente. Essas enzimas foram isoladas por cromatografia líquida de alta resolução. Os ensaios enzimáticos com o substrato sintético Z-Phe-Arg-MCA e com os inibidores EGTA, EDTA e 1, 10 fenantrolina indicam que essas enzimas são metaloproteases.

1. metaloproteases
2. proteases extracelulares
3. Brevundimonas diminuta
4. extracellular proteases
5. ptevundimonas diminuta
6. metalloproteases
7. Pseudomonadaceae