Primary embryonic cells of Rhipicephalus microplus and Amblyomma cajennense ticks as a substrate for the development of Borrelia burgdorferi (strain G39/40)
Rezende, J.Rangel, CP.Cunha, NC.Fonseca, AH.
Borrelia burgodorferi, o agente da borreliose de Lyme, é uma espiroqueta transmitida por carrapatos aos seres humanos e animais. Seu cultivo in vitro em células de carrapato permite estudos de sua biologia e propicia metodologia para futuras pesquisas no Brasil, para o isolamento de Borrelia spp. Nós examinamos in vitro as características de células embrionárias de Rhipicephalus microplus e Amblyomma cajennense, e a viabilidade de utilização dessas células embrionárias como um substrato para cultivo de B.burgdorferi. Subculturas foram preparadas a partir de culturas primárias de células embrionárias de R. microplus e A. cajennense mantidas em meio Leibovitz's (L-15) completo, a 28 ºC e 31 ºC, respectivamente. Com a formação da monocamada, o L-15 foi substituído pelo meio Barbour-Stoener-Kelly, para o experimento de infecção com B. burgdorferi nas culturas de células. Após 72 horas de cultivo, realizou-se a contagem das espiroquetas, as quais foram avaliadas sob microscópio invertido de contraste de fase e campo escuro (400×). Verificou-se a sobrevivência, a multiplicação e a aderência de B. burgdorferi em células embrionárias de R. microplus e A. cajennense. No estudo da cultura de B. burgdorferi com células embrionárias de R. microplus, observou-se, na contagem final, média de 2,4 × 10(7) espiroquetas/mL; no cultivo livre de células, verificou-se média de 2,5 × 10(7) espiroquetas/mL. No cultivo de A. cajennense, a contagem final de espiroquetas foi, em média, 1,7 × 10(7) espiroquetas/mL, enquanto que, para as cultivadas livres de células, se verificou média de 2,2 × 10(7) espiroquetas/mL. Resultado semelhante foi observado na contagem final de espiroquetas cultivadas em células de R. microplus e A. cajennense, quando comparado com o controle livre de células. Estes resultados demonstraram que células de R. microplus e A. cajennense têm o potencial para serem utilizadas como substrato para o crescimento de B. burgdorferi no estudo da interação com as células do hospedeiro.
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