Estudo comparativo de quatro protocolos de extração de DNA do músculo adutor em mexilhão dourado (Limnoperna fortunei)
Murari, Pâmela Juliana FurlanSouza, Felipe Pinheiro deOliveira, Marcos Vinicius deOliveira, Sheila Nogueira dePovh, Jayme AparecidoLopera-Barrero, Nelson Mauricio
O mexilhão dourado, Limnoperna fortunei é um molusco originário do sudeste da Ásia, altamente invasor em países Sul-Americanos como Brasil, Uruguai e Argentina. Para compreender melhor o comportamento biológico da espécie e criar alternativas de controle é indispensável a realização de estudos genéticos, onde a otimização dos procedimentos de isolamento do DNA é fundamental.O objetivo desse estudo foi obter um protocolo simples, reproduzível, não contaminante e barato para a extração do DNA de L. fortunei. Foram comparados quatro protocolos experimentais de extração de DNA, utilizando como material biológico o músculo abdutor: extração por SDS e proteinase K (P1), extração por SDS, proteinase K e fenol (P2), extração por Trizol (P3) e extração por NaCl (P4). A quantificação (ng μL-1) e a pureza (260/280 nm) do DNA foram obtidas por espectrofotometria. A integridade e a amplificação do DNA foram verificadas através de eletroforese e PCR, respectivamente. P1 demonstrou baixas concentrações e ausência de DNA nas amostras, identificado pela quantificação e teste de integridade. P2 apresentou baixa eficácia, visualizada pela ausência de DNA na maioria das amostras na eletroforese. Por outro lado, P3 exibiu sinais de contaminação por proteínas, identificado pela razão de absorbância <1.8 e pela baixa qualidade da eletroforese. Finalmente, P4 mostrou um padrão na formação das bandas, absorbância entre 1,8 2,0 e sucesso na amplificação pela PCR. Conclui-se que o protocolo de extração P4 mostrou-se como um método prático, rápido, não contaminante e eficiente para obtenção do DNA de L. fortunei.(AU)
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