A utilizacao do cimento de fosfato de calcio como arcabouco para engenharia de tecido osseo: estudo in vitro
Silva, Tais Somacal NovaesPrimo, Bruno TochettoSilva Junior, Aurelicio NovaesMachado, Denise CantarelliViezzer, ChristianSantos, Luis Alberto
Objetivo: Avaliar a capacidade de suportes tridimensionais macroporosos de cimento de fosfato de calcio (CFC), de permitir a adesao, proliferacao e diferenciacao de celulas-tronco mesenquimais derivadas da medula ossea humana. Metodos: celulas obtidas da crista iliaca de um doador humano adulto foram processadas e cultivadas sobre suportes de CFC, macroporosos, que tiveram como corpo gerador de poros, microesferas de parafina, com tamanho entre 100 e 250µm. Os periodos de cultura estabelecidos foram de cinco, 10 e 15 dias. Apos estes periodos, o comportamento e a morfologia das celulas junto ao biomaterial foram avaliados por meio de Microscopia Eletronica de Varredura. Os niveis de expressao dos genes BGLA e SSP1 bem como a atividade da Fosfatase Alcalina (ALP) foram quantificados pela tecnica de PCR em Tempo Real (QT-PCR) utilizando o fluoroforo SYBR Green®. Resultados: O QT-PCR detectou a expressao dos genes BGLA e SSP1 e a atividade da fosfatase alcalina nos periodos de 10 e 15 dias de cultura. No periodo de cinco dias, nao foi observada a expressao de nenhum dos genes investigados. Conclusao: O CFC, macroporoso, com tamanho de poros entre 100 e 250µm, criados por meio da utilizacao de microesferas de parafina, permite a adesao, proliferacao e diferenciacao de celulas-tronco mesenquimais em celulas osteogenicas, podendo ser utilizado como arcabouco para engenharia de tecido osseo.(AU)
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